磁珠由微小的氧化铁颗粒(20至30 nm)组成,例如磁铁矿(Fe3O4),它们具有超顺磁性。该性质取决于珠粒中颗粒的尺寸,并使珠粒及其结合的任何物质都能悬浮于多种体内实验,比如药物传递、磁共振成像(MRI)造影剂和热疗等。但是因为磁珠材料本身的生物相容性和细胞毒性等因素,限制了磁珠在体内实验的应用,反而在体外实验应用得到更广泛的发展,比如细胞和外泌体分离、核酸提取、生物药物的靶点鉴定及代谢性质研究、蛋白纯化与免疫层析等。本文主要讲述有关核酸提取方面的应用。
1、核酸提取
通过对磁珠进行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),从而可以实现对核酸的高通量、自动化提取,这一技术产生于20世纪80年代,已经有了成熟的试剂盒并形成为产业。
现在临床检测市场上普遍使用硅基材质的羧基/羟基磁珠来进行核酸提取,方法是磁珠在某种酸碱条件下和溶液中的核酸通过疏水作用、氢键作用和静电作用等发生特异性结合,迅速从生物样品中分离核酸,有利于核酸的自动化和高通量提取。这种针对于临床检测市场的核酸提取磁珠技术比较成熟,已经基本实现国产化,操作简单方便。
2、磁珠法核酸提取组分及步骤
磁珠法核酸提取试剂一般有裂解液、结合液、磁珠悬液、洗涤液、洗脱液5种试剂成分组成,目前本公司的试剂盒实现了裂解结合一步进行,所以一共有裂解液、磁珠悬液、洗涤液、洗脱液4种基本试剂组成。
细胞或组织在裂解液作用下,其中的DNA/RNA被释放出来。此时经过表面修饰的具有超顺磁性的磁珠即与核酸进行“特异性结合”,形成“核酸-磁珠复合物”。然后在外加磁场的作用下,复合物即分离出来。最后经过洗脱液洗去非特异性吸附的杂质、去盐、纯化后,即得到欲提取的核酸物质。
磁珠法提取核酸一般分为4步:裂解、结合、洗涤、洗脱。
裂解:使细胞中的核酸(DNA/RNA)游离出来。
结合:使核酸在一定条件下与磁珠结合在一起。
洗涤:使核酸与磁珠上的杂质清洗除去。
洗脱:使核酸在一定条件下与磁珠分离开来。
本公司磁珠法提取基因组DNA一般OD260/280在1.7-2.0左右,OD260/230在1.4以上,且电泳条带清晰,无拖尾现象,点样孔无滞留,说明纯度较高,DNA片段完整,可直接用于PCR扩增的模板。
成立于2016年,位于上海市青浦区张江云立方园区。公司长期致力于生物领域内相关产品的研发、生产和销售,产品主要包括和。公司一直坚持以“质量、诚信、团结、奋进”为宗旨,严格规范质量管理体系,持续创新、精益求精,为客户提供优质的产品和服务,被认定为国家级高新技术企业和上海市专精特新企业。