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真菌DNA/RNA提取 (磁珠法)

发表时间:2024-01-19

真菌DNA/RNA提取 (磁珠法)

真菌,是自然界中广泛存在的微生物,在生态系统中占据一份很重要的地位。并且,真菌也是一种可以引发很多疾病的病原体,比如,白色念珠菌、隐球菌脑膜炎、毛霉菌等,所以,对于真菌的研究和检测具有比较重要的意义。 真菌DNA/RNA提取试剂是用于提取真菌细胞中的DNA/RNA,用于下游实验的分析和检测。而这种真菌核酸提取试剂的优点也很多,不论是操作,速度和效率,都是表现优良,同时,这种试剂也用途广泛,可以用于多类真菌的核酸提取,如酵母菌,食用菌,念珠菌,等可以应用于真菌的分子生物学研究、疾病诊断、药物研发等领域。

就以领骏生物有限公司产品为例:真菌DNA/RNA提取试剂。

这种试剂盒内包括裂解结合液,磁珠,异丙醇,洗涤液,还有洗脱液等试剂。


一、样本处理

杏鲍菇、香菇

二、裂解结合

 在使用时,需要将真菌样本放置生理盐水中破碎,然后加入裂解结合液,使DNA/RNA从细胞中释放出来,然后离心取上清。

三、洗涤

使用领骏生物公司的洗涤液进行洗涤,这一步可提高基因组的纯度。不同样本可进行轻微调整。

四、洗脱

洗脱的步骤就是将吸附在磁珠表面的基因组DNA洗脱下来,并溶于洗脱液中,然后进行其他下游实验。

案例1:同一批次试剂提取不同新鲜真菌的实验结果:

样本

序号

A260/A280

A260/A230

Conc.(ng/μL)

杏鲍菇菌褶20 mg

1

2.192

1.541

349.95

2

2.187

1.501

310.1

3

2.191

1.527

320.25

平均值

2.19

1.523

326.7667

香菇菌褶  20 mg

4

2.22

1.839

300.1

5

2.228

1.808

307.3

6

2.224

1.839

317.25

平均值

2.224

1.828667

308.2167

电泳图如下:


1-3杏鲍菇  4-6香菇

结果分析:试剂的提取效果很好(提取产物纯度好、浓度高、电泳条带完整)