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动物组织样本处理的注意事项和方法

发表时间:2024-05-08

动物组织基因组DNA提取是分子生物学和遗传学研究的关键步骤之一。下面是一些关于样本处理的注意事项及方法,以确保提取到高质量和纯度的DNA。

注意事项:

1. 样本收集:在收集动物组织样本时,应注意防止样本受到污染。最好使用无菌操作,并使用无菌工具采集样本。

2. 样本处理:样本处理前应将所有工作台面和仪器消毒,以避免外源核酸污染。同时保持操作环境干净整洁。

3. 样本保存:为避免DNA降解,可将样本冷冻保存在-20°C的冰箱内。避免长时间暴露在室温下,防止核酸酶和细菌的污染。

方法:

1. 细胞破碎:将动物组织样本切割成小块或使用细胞破碎缓冲液将其破碎,以释放细胞内的DNA。可选择机械破碎、酶消化或冻融等方法。

2. 蛋白质沉淀:加入酚/氯仿混合液,使DNA分离到上层水相。通过离心分离DNA上层的水相,并丢弃蛋白质底层。

3. DNA沉淀:将上层水相转移至新的离心管中,加入等体积的异丙醇,并轻轻摇晃混匀,使DNA沉淀。通过离心沉淀DNA,并丢弃上清液。

4. 洗涤和纯化:使用70%乙醇洗涤DNA沉淀,去除残留的盐和杂质。然后使用TE缓冲液溶解DNA,以获得纯净且稳定的DNA样品。

5. 检测DNA质量:使用分光光度计或凝胶电泳等方法检测提取到的DNA质量和浓度,确保其适用于后续实验分析。