磁微粒是指磁性纳米粒子与无机或有机分子结合形成的可均匀分散于一定基液中具有高度稳定性的胶态复合材料。在磁微粒表面或通过磁微粒表面的功能基团将酶、抗体、寡核苷酸等生物活性物质进行固定,可进一步用于酶的固定化、靶向药物载体、细胞分选、免疫检测、蛋白与核酸的分离纯化及杂交检测等领域。 磁微粒化学发光免疫检测是将磁性分离技术、化学发光技术、免疫分析技术三者结合起来的一种新兴分析方法,该技术充分利用了磁性分离技术的快速易自动化性,化学发光技术的高灵敏度性,以及免疫分析的特异性,在生物分析领域展现了不可替代的作用。目前,磁微粒化学分析免疫分析已经应用于管式化学发光免疫检测项目以及电化学发光免疫检测项目。 传统的免疫学检测中以酶标板为固相载体。而悬浮性磁微粒作为载体具有较高的比表面积,能够更为充分地与样品反应,加之外加磁场的灵活应用,具有更高的灵敏度、更快的检测速度和更好的重复性等优点。 根据免疫标记物也即发光原理的不同,化学发光分析种类大致分为以下三类:
一、直接化学发光采用吖啶酯、异鲁米诺衍生物ABEI等作为示踪物质标记抗原或抗体分子形成发光标记物,采用纳米微球为固相载体的分离方式,通过碱性液诱导结合标记物发光,并通过测定发光强度实现对超微量物质的定量分析。吖碇酯在不需要催化剂的情况下即可分解、发光。
主要优点:试剂稳定性好,易于保存;标记物为小分子,对标记的抗原/抗体的空间位点几乎不造成影响;本底低,灵敏度好,结果稳定。
二、间接化学发光(酶促化学发光)用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗体,在与待测标本中相应的抗原(或抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物,经洗涤后,加入底物(也就是发光剂),酶催化和分解底物发光。
主要优点:发光过程中作为标记物的酶基本不被消耗,发光信号强而稳定,且发光时间较长;检测方式简单、成本较低。
三、电化学发光(罗氏专利)以电化学发光剂三联砒锭钌标记抗体(或抗原),以三丙胺(TPA)为电子供体,在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应,它包括电化学和化学发光两个过程。
主要优点:可控的反应体系,快速检测时间,高精密度,高灵敏度,宽广的检测范围;
用于化学发光免疫的磁性微球目前用于化学发光的磁微粒种类较多,但都有一些基本的要求,包括磁响应快、单分散、粒径均匀、悬浮度高、非特异性吸附低、批间稳定等。目前最常用的为磁性聚苯乙烯(PS)微球。在全球市场上,磁微粒化学发光试剂主要为跨国公司垄断,其中ThermoFisher(Dynabeads)、JSR、Merk、GE等的磁性微球占有较大市场份额。近年来,国内亦涌现出一些磁性微球较为出色的公司。羧基、氨基和链霉亲和素磁珠是其中最常选用的表面功能化磁珠。
上海领骏生物科技有限公司成立于2016年,位于上海市青浦区张江云立方园区。公司长期致力于生物领域内相关产品的研发、生产和销售,产品主要包括磁性纳米材料和磁珠法核酸提取纯化试剂。公司一直坚持以“质量、诚信、团结、奋进”为宗旨,严格规范质量管理体系,持续创新、精益求精,为客户提供优质的产品和服务,被认定为国家级高新技术企业和上海市专精特新企业。